薛峰l’2，黄金林3，蒋原1，焦新安3，陆承平2
（1．江苏省出入境检验检疫局2．南京农业大学动物医学院3．扬州大学江苏省人兽共患病学重点实验室
弯曲菌是一种重要的人兽共患病原菌，尽管大多数弯曲菌感染是自限性的，通常的治疗方法是补液，抗生素治疗只用于严重、病程长或全身感染病例或高风险人群。常用的抗生素治疗主要是氟喹诺酮类和大环内酯类，四环素是备选，实际临床上很少应用。在严重病例或全身感染时，也常用氨基糖苷类静脉途径给药。
抗生素在抗微生物感染中的作用是显而易见的，但不正确的大规模使用已经导致了人兽共患病原菌多重耐药性的产生。耐药性的产生已经成为世界卫生组织（WHO）和多国权威机关公认的公共卫生问题。弯曲菌耐药菌株主要来自动物，但对人弯曲菌病的治疗带来威胁，耐药性已经导致人和动物临床治疗的挑战。耐药菌株引发弯曲菌感染病例病程增长、发病重，尤其是临床常用的红霉素和氟喹诺酮类抗生素。
1弯曲菌抗生素敏感性测定方法
纸片扩散法、肉汤微量稀释法、琼脂稀释法和E．test等多种方法用于弯曲菌抗生素敏感性测定，尽管美国临床实验室标准化研究所（NCCLS）对药敏试验的程序等作详细说明，但国际上没有一个弯曲菌公认的抗生素敏感性测定标准。2002年6月，NC．CLS推荐琼脂稀释法测定弯曲菌耐药性。但欧洲人兽共患病参考实验室仍没有明确测定方法，这也导致在测定方法和结果上存在差异。
一些研究者对上述测定方法进行了比较。Fredi―ani．Wolf和Stephan应用纸片扩散法、E-test和微量稀释法分析了空肠弯曲菌分离株的抗生素敏感性和耐药性，发现纸片扩散法是一种可信度高、简单易行的方法，E-test和琼脂稀释法适合于小规模、单一地区分离株的分析，微量稀释法是大规模耐药性分析的首选方法。与这些研究不同的是，Ge等认为不同抗生素的评价指标应多样化。
现代分子技术的应用为细菌分离株耐药性测定提供了又一方法，但这一技术依赖于对相关耐药基因的分析。错配扩增突变分析PCR法（MAMA．PCR）和荧光定量突变法等分子技术已成功应用于环丙沙星耐药性空肠、结肠弯曲菌的检测，弯曲菌gyrA基因Thr-86-Ile位的突变与环丙沙星耐药性相关。多列探针检测法（1ineprobeassay）也被应用于空肠、结肠弯曲菌对苯二酚和大环内酯类耐药性的同时检测。
分子生物学方法的最大优势是不需要培养微生物可直接从样品中检测到突变基因，尤其对困难的微生物和大规模耐药性分析；主要缺点是对新的突变基因无法检测，及对每一个抗生素要分开检测。因此，通常将表型和基因型方法结合来测定耐药性。
2人源弯曲菌临床分离株的耐药性监测
2005年9月，弯曲菌和幽门螺杆菌等相关病原微生物国际会议在欧洲召开，会上交流了最新的细菌耐药研究进展。Gallay开展了较为详细的弯曲菌耐药性研究，417家研究机构共分离了4090株，总体耐药性以下：红霉素少于5％、四环素31％、氨苄青霉素39．2％，结肠弯曲菌耐药均高于空肠弯曲菌，对萘啶酮酸耐药率分别为39．9％和27．2％，对庆大霉素没有耐药性。
在德国也有类似研究，Krausse和Ullmann对367株空肠、结肠分离株进行耐药性分析，抗生素包括6种氟喹诺酮类、2种大环内酯类和四环素。加替沙星、莫西沙星最敏感（MIC904mg／L），环丙沙星MIC9032mg／L。另外，研究显示，38％的分离株至少对l种氟喹诺酮类抗生素耐药，l4．4％的分离株对所有对苯二酚类抗生素耐药，四环素耐药明显增加，从1999年的22．3％到2004年41．9％。
弯曲菌感染是最常见的指定监测的疾病，但在抗生素监测方面的信息相对较少。奥克兰的一项研究在对202株肠道分离株（多种微生物）耐药性的分析显示，对庆大霉素无耐药性，对强力霉素、红霉素和环丙沙星的耐药性分别为1％、l．5％和2．5％，3年后，对同一地区的200株分离株的研究显示，红霉素耐药性空肠弯曲菌较非空肠弯曲菌要低，l5株空肠弯曲菌分离株中3％的产生了红霉素耐药性，而非空肠弯曲菌达到40％。
2．3澳大利亚
Korolik等分别收集了l989～1990年和l994～1995年期间的人源空肠弯曲菌分离株81株和79株、结肠8株和6株，在2次试验中，空肠弯曲菌红霉素耐药从44％下降至5％、结肠从50％下降至33％，强力霉素耐药率分别从l0％下降至2．5％、25％至l6％，恩诺沙星没有产生耐药性。Huysman和Tumidge对l00株分离株的分析表明，所有菌株耐药性较轻，敏感的抗生素有红霉素、庆大霉素、萘啶酮酸和环丙沙星，9株分离株对四环素耐药。
Itoh等分离了245株空肠弯曲菌，111株来自1979年～l982年间腹泻人群，134株分离自牛、禽和野禽；72株结肠弯曲菌，18株来自人群，54株分离自猪，并测定了分离株对氨苄西林（APC）、红霉素（EM）、头孢哌酮（CO）、四环素（TC）、阿米卡星（AMK）、庆大霉素（GM）、卡那霉素（KM）、头孢唑肟（CER）、萘啶酸（NA）等9种抗生素的耐药性，所有人源空肠弯曲菌分离株对APC、EM、CP、AMK、GM、KM和NA敏感，CER的MIC值为3．12～100μg／mL，另外，69％的人源分离株对Tc耐药；结肠弯曲菌的抗生素耐药性与空肠类似，但猪分离株对EM、KM的耐药性要高，分别为44％、59％，此外，弯曲菌分离株还存在着多重耐药性。
许海燕等对93株空肠弯曲菌医院分离株耐药性分析显示。在21种药物中，对分离株处于中度敏感和高度敏感的只有8种，占38．10％。对氨基糖甙类、大环内脂类、青霉素类抗生素较为敏感，而对头孢菌素类、喹诺酮类、磺胺类和四环素类抗生素产生了较强的耐药性，不同医院、不同诊区、不同月份的分离株对21种抗生素的敏感性和耐药性无显著性差异；多重耐药主要集中在9耐到l4耐，2家医院分别占82．96％、79。16％，两医院多重耐药性无显著性差异；但不同诊区分离菌多重耐药性存在显著性差异，门诊部主要集中在9耐至l4耐，占80．68％，住院部集中在10耐至l2耐。
