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在使用抗生素期间或停用抗生素后短期内，特别是在应用林可霉素，氯林可霉素后，突然出现无红细胞的粘液腹泻；或腹部手术后病情反而恶化，并出现腹泻时，应想到本病，通过乙状结肠镜 检查，见到伪膜及粪中细胞 毒素测定阳性可迅速获得诊断。
（一）实验室检查：周围血白细胞增多，多在10，000～20，000／mm3以上，甚至高达40，000／mm3或更高，以中性粒细胞增多为主，粪常规检查无特异性改变，仅有白细胞，肉眼血便少见，有低白蛋白血症，电解质失平衡或酸碱平衡失调，粪便细菌特殊条件下培养，多数病例可发现有难辨梭状芽孢杆菌生长，粪内细胞毒素检测有确诊价值，将患者粪的滤液稀释不同的倍数，置组织培养液中，观察细胞毒作用，1∶100以上有诊断意义，污泥梭状芽孢杆菌抗毒素中和试验 常阳性。
（二）内镜检查 ：在高度怀疑本病时，应及时作内镜检查，本病常累及左半结肠，而直肠可无病变，乙状结肠镜检查是重要的诊断手段之一，如病变在右半结肠，则需用纤维结肠镜检查，如在初期未发现典型病变者尚需重复进行，内镜肉眼观察：在早期或治疗及时者，内镜可无典型表现，肠粘膜可正常，或仅有轻度充血，水肿，严重者可见到粘膜脆性增强及明显溃疡形成，粘膜表面覆有黄白或黄绿色伪膜。
（三）X线检查：腹部平片 可显示肠麻痹或轻，中度肠扩张，钡剂灌肠检查可见肠壁增厚，显著水肿，结肠袋消失，在部分病例尚可见到肠壁间有气体，此征象为部分肠壁坏死，结肠细菌侵入所引起；或可见到溃疡或息肉样病变表现，上述X线表现缺乏特异性，故诊断价值不大，空气钡剂对比灌肠检查可提高诊断价值，但有肠穿孔的危险，应慎用。
