[摘要]目的 对某一餐厅发生的一起婚宴食物中毒事件进行病原菌的检测。方法参照GB4789-94及《卫生防疫细菌检验》方法对患者肛拭及剩余食物进行病原学检测。结果10份标本中8份检出副溶血弧菌，5份检出奇异变形杆菌，发病初期与恢复期血清学抗体实验有4倍增高。结论 本次食物中毒是由副溶血弧菌和奇异变形杆菌混合感染引起。[关键词]食物中毒；副溶血弧菌；奇异变形杆菌
2002年10月，攀枝花市大渡口一餐厅发生一起婚宴食物中毒事件，就餐人员248人，中毒人数42人；进餐后5～12h相继出现腹痛（上腹绞痛）、腹泻，水样便（重者为血水样便），恶心、呕吐等消化道潜症状，个别患者发热，病人经医院治疗或病人自服药后全部康复，无不良预后。经流行病学调查以及实验室检验，确认为副溶血弧菌和奇异变形杆菌混合感染引起的食物中毒，现将结果报告如下。1 材料与方法1.1 标本来源7位患者肛拭及婚宴剩余食物烤鸭骨架2份与鱼翅1份。1.2 材料与试剂除氯化钠结晶紫增菌液、TCBS琼脂、3.5%氯化钠三糖铁琼脂自配外，其它试剂由上海生化试剂厂生产；沙门氏菌血清、志贺氏血清、致泻性大肠埃希氏菌血清，霍乱“O”多价及霍乱O139血清为四川省成都生物制品研究所生产。所有实际均在有效期内使用。1.3 检验依据按GB4789-94[1]及《卫生防疫细菌检验》[2]方法检测。2 结果2.1 培养标本经过增菌后，根据不同的增菌液划相应的选择性平板，进行了沙门氏、志贺氏、致泻大肠埃希氏菌、变形杆菌、副溶血性弧菌、霍乱弧菌的检测，排除了沙门氏、志贺氏、致泻大肠埃希氏菌、霍乱弧菌感染的可能。2.2 分离出副溶血性弧菌从7份肛拭及1份烤鸭骨架标本中分离出8株副溶血性弧菌。2.2.1 培养 标本经直接分离和增菌后培养，该菌在氯化钠结晶紫增菌液中浑浊生长，在氯化钠蔗糖琼脂平板和TCBS琼脂上为圆形、光滑、湿润、绿色菌落。2.2.2 形态染色特征 涂片镜检为革兰氏阴性无芽孢弧菌。2.2.3 生化试验 氧化酶+、3.5%氯化钠三糖铁-/+、H2S-、动力+、嗜盐试验中无盐胨水与10%氯化钠胨水不生长，6%、8%氯化钠胨水生长良好，葡萄糖+、乳糖-、麦芽糖-、甘露醇+、蔗糖-、鼠李糖-、β半乳糖苷-、硝酸盐+、溶血+、靛基质+、甲基红+、明胶液化+、赖氨酸+、精氨酸-、鸟氨酸-、卫矛醇-、V-P-、尿酶-。2.2.4 血清抗体定量凝集试验将副溶血性弧菌用无菌盐水分别稀释为15亿/ml的菌液，与患者发病初期和恢复期（10天）血清做凝集试验，结果为发病初期7份血清凝集效价均小于1:10，而恢复期的3份血清凝集效价为1:40。2.3 分离出5株奇异变形杆菌从4份肛拭和一份烤鸭骨架中分离出奇异变形杆菌。2.3.1 培养 标本经直接分离和增菌后培养，该菌在肉汤中显著浑浊，表面有菌膜，在血平板上呈迁延性生长。2.3.2 形态染色特征 涂片镜检为革兰氏阴性无芽孢杆菌。2.3.3 生化试验 氧化酶-、氰化钾-、H2S+、动力+、尿素（2～4h）+、明胶液化（22℃）+、苯丙氨酸+、葡萄糖+、乳糖-、麦芽糖-、甘露醇-、蔗糖-、靛基质-、甲基红+、赖氨酸-、V-P-、精氨酸-、鸟氨酸双水解酶+。2.3.4 融合试验 将从患者肛拭分离出的4株奇异变形杆菌分别点在血琼脂平板的外侧，平板中心点种从烤鸭中分离出的奇异变形杆菌，经37℃培养24h后观察，结果显示中心处的蔓延菌落与周围4株的蔓延菌落相互融合，可视为同型菌。2.3.5 血清抗体定量凝集试验 将奇异变形杆菌用无菌盐水分别稀释为15亿/ml的菌液，与患者发病初期和恢复期（10天）血清做凝集试验，结果为发病初期7份血清凝集效价均小于或等于1:40，而恢复期的3份血清凝集效价为1:160。3 讨论副溶血性弧菌是分布极广的海洋细菌，由该菌引起的食物中毒潜伏期为1～4d,多数为10h左右；起病急促，常有腹痛、腹泻、呕吐、失水、畏寒等症状[3]。江阴市经过10年监测发现，该菌于每年6～10月检出[4，5]，主要是海产品或盐渍品[6]，常见者为虾、蟹类、乌贼、海蛰、鱼类、黄泥螺等[7]，其次是蛋品、肉类或蔬菜。在加工海产品过程中，污染其它食品或厨具，或食用海产品未经充分加热煮熟而引起食物中毒，我国沿海地区夏秋季节由此菌引起的食物中毒占首位[8]。奇异变形杆菌常存在于人和动物肠道中，为条件致病菌，当肉类食品污染此菌后大量繁殖而不发生感官改变，大量食用后易发生食物中毒，近年多有奇异变形杆菌引起食物中毒的报道[9]。调查中发现，该餐厅无消毒设施，厨师卫生意识淡薄，卫生习惯差，攀枝花市虽是内陆城市，但随着现代化交通和冷冻业的发展，使得鲜活的海产品能快速抵达，加之亚热带河谷季风气候，常年气温温暖，海产品中的副溶血性弧菌易污染其他食物，该餐厅生、熟食菜板混用，工作人员在婚宴结束后食用未彻底加热的烤鸭骨架全体发病。本次食物中毒经流行病学调查以及实验室检测，证实是由副溶血弧菌和奇异变形杆菌混合污染婚宴食品引起的食物中毒。此次从食物中毒标本中检出副溶血弧菌，在本市尚属于首次，应引起本地卫生部门的高度重视。参考文献[1]中华人民共和国卫生部．食品卫生检验方法（微生物部分）.北京：中国标准出版社，1995：14-41.[2]何晓青.卫生防疫细菌检验[M].南昌:新华出版社,1989:244-245,301-329.[3]孙旦，徐瑞良.副溶血性弧菌、志贺氏菌属10年监测分析[J].江苏预防医学，1998，9（1）：44-45.[4]乔华林.副溶血性弧菌的致病性及其检测和测定［J］.水产科学，1999，18（4）：28-30.[5]林云万，邓桂丽，李孝权，等.一起由副溶血性弧菌引起的食物中毒的实验室检测［J］.中国卫生检验杂志，2006，16（4）：473-475.[6]黄云川，李建兰，叶茜，等．3起副溶血性弧菌引起的食物中毒调查［J］.海峡预防医学杂志，2006，12（6）：43-44.[7]林祥田.94起副溶血性弧菌食物中毒流行病学特征分析［J］.上海预防医学杂志，2006，18（3）：141-143.[8]胡晓抒，袁宝君．食源性疾病的预防控制［M］.南京：南京大学出版社，2005.126.[9]倪祝琴，徐景野，金晓霞，等.一起由副溶血性弧菌和嗜气单胞菌混合感染引起的食物中毒[J].中国卫生检验杂志.2001.11：382.
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