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2009-12-08 www.ehsy.com A +

鼠药(毒鼠强、氟乙酰胺、敌鼠等)中毒残留物的快速筛选检测
在我国,每年食物中毒事件中,鼠药中毒占有相当大的比例。杀鼠药对人、畜皆具有不同程度的毒性,误食或人为投毒食用后,严重者有致命的后果。目前常用的杀鼠药有敌鼠、安妥和磷化锌。“毒鼠强”和“氟乙酰胺”虽然早已被国家所禁令使用,而近年来鼠药中毒事件仍以“毒鼠强”、“氟乙酰胺”和“敌鼠”为主。几种鼠药的化学性质与定性方法如下。  
  1.化学性质:
  1.1毒鼠强:毒鼠强又名没鼠命,三步倒,四二四等。轻质粉末。熔点250~254℃。在水中溶解度约0.25mg/ml,在丙酮、乙酸乙酯、苯中的溶解度大于水,溶于二甲亚砜。可经消化道及呼吸道吸收。不易经完整的皮肤吸收。哺乳动物口服最低致死剂量为0.10mg/kg。口服6~12mg即为人的致死量,剂量大时,3分钟即可致死。
  1.2氟乙酰胺:氟乙酰胺又称敌蚜胺、1080,也称“一扫光”,对人畜具有剧毒性,且可造成人畜二次中毒。氟乙酰胺在干燥条件下比较稳定,易溶于水,在中性和酸性水溶液中可水解成氟乙酸,在碱性水溶液中可水解成氟乙酸钠释放出氨。
  1.3敌鼠钠盐:敌鼠的化学名为2-二苯基乙酰基-1,3-茚二酮。一种抗凝血的高效杀鼠剂,可使内脏出血不止而死亡。市售的是1%敌鼠粉剂和1%敌鼠钠盐。对人畜有剧毒。钠盐口服0.06~0.25克可引起中毒,0.5~2.5克可致死。
  1.4安妥:安妥的化学名称为甲萘硫脲。对人的致死量为4~6克。纯品为无色结晶,工业品为灰紫色粉末,不溶于水,稍溶于硝酸,可溶于碱液及有机溶剂,易溶于丙酮。
  1.5磷化锌:磷化锌也是一种常用的杀鼠药。它是深灰色或近似黑色、有闪光的重质粉末,易溶于酸并产生无色具有蒜臭的剧毒磷化氢气体。误食后在胃酸作用下,放出磷化氢,腐蚀刺激消化道,吸收入血后,能破坏机体代谢,并能作用于内分泌及神经系统,毒物经肝脏解毒,肾脏排泄,故可引起肝肾的损害。
  2.检测用试剂
  2.1毒鼠强定性试液包
  2.2敌鼠钠盐定性试液包
  2.3安妥定性试纸
  2.4氟乙酰胺定性试液包
  3毒鼠强、敌鼠钠盐、安妥测定前的样品处理
  3.1无色液体(饮用水等):样品不需处理,直接进入样品测定。
  3.2液体样品(牛奶、豆浆等):取1~3ml放入比色管中,加入5ml乙酸乙酯,上下振摇50次以上,静置后取上清液测定。
  3.3固体(粮食、面粉、毒铒等)或半固体(呕吐物、胃内容物、剩余饭菜等)样品:取1~3克放入比色管中,加入5ml乙酸乙酯,充分振摇,静置后用滤纸过滤,取澄清液测定。
  
  4毒鼠强测定:取样品处理后的上清液或滤液2ml以上于10ml比色管中,在85℃±5℃的水浴中加热挥干乙酸乙酯,放至室温后,向试管中加入2滴毒鼠强显色剂,加入5ml(约115滴)毒鼠强试液(强酸溶液,谨慎操作),轻轻摇动后,将试管放回水浴中,加热3~5分钟取出,观察颜色变化。同时做空白和阳性对照试验。阳性反应为淡紫红到深紫红色。阴性为试剂本色。检出下限5μg。
  4.1注意事项:①空白对照试验,是取与检样相同(不含毒鼠强)的物质与检样同时操作,以便于观察对比。对于呕吐物、胃内容物等样品,一定要加阳性对照试验。②有些样品的提取液带有较深的颜色,应加大提取液的用量,在提取液中加少量活性炭,或中性氧化铝,振摇脱色,过滤后滤液挥干测定。经过脱色的样品,毒鼠强会有一些损失,一般在30~40%。③本方法为快速筛选方法,工作中可根据实际情况加大样品和乙酸乙酯用量。提取后的乙酸乙酯应尽量少含水分(一是不易挥干,二是水分中可能会含有糖、纤维素等成分,干扰测定),如果含的水分多,可加入无水硫酸钠进行脱水后过滤,并将乙酸乙酯挥干后测定。④本方法不适于血液和组织器官样品的测定。⑤醛类物质对测定有干扰。排除方法:液体样品加热煮沸2分钟,固体样品置90℃烘箱加热30分钟后再测定。⑥毒鼠强的检测目前无国家标准分析方法,对重要案件的处理要慎重,应采用气相或液相色谱做进一步对照确定。对于中毒案件,还可根据中毒者的中毒症状作参考。⑦毒鼠强显色剂有效期1年,阳性对照试验无反应时不可再用。
  4.2毒鼠强定性试液的配制:如果有定制包装的毒鼠强定性试液包,可以直接使用。如果有毒鼠强显色剂,可按以下方法配制毒鼠强定性试液。
  毒鼠强显色剂为茶色或棕色带有微红色的酸性液体,配置成定性液与毒鼠强反应后变成淡紫红到深紫红色。阴性为试剂本色
  取200ml蒸馏水或纯净水于烧杯中,缓慢加入300ml优级纯硫酸,边加边搅拌,等溶液凉至室温后,用水补齐至500ml即为60%的硫酸,将毒鼠强显色剂(10ml/支)小心加入,混匀后即为毒鼠强定性液。每份样品使用5ml。显色剂与60%硫酸也可单独使用,即向样品中加入2~3滴显色剂,再加入5ml60%的硫酸,具体使用方法详见毒鼠强快速定性试液包使用说明书。
  
  5敌鼠钠盐测定:将试纸对折裁开,将处理后的样品溶液1滴于一片试纸上,(根据对样品的怀疑程度。可等溶液稍干后,追加样品溶液的滴数以提高方法的灵敏度),待溶液稍干后,在滴加样品溶液处滴上1滴敌鼠显色剂,如果出现砖红色斑点为强阳性反应,如果出现红色环状为弱阳性反应。方法灵敏度:检出限量为5微克。
  
  6安妥测定:将提取液1滴于安妥检测试纸片上,并喷上雾水或用水使纸片湿润,观察试纸颜色变化,呈现黄色,示有安妥存在(最低检出限为0.02mg/g,ml)。
  
  7氟乙酰胺测定
  方法一
  7.1样品处理:无色液体可直接测定。有颜液体,可加少量活性炭或中性氧化铝振摇脱色,过滤后测定。固体样品研碎后取2~5克加3倍于样品重的蒸馏水或纯净水,半流体样品取2~5克加等量于样品重的蒸馏水或纯净水,振摇提取,过滤,将滤液煮沸浓缩至1ml左右测定。中毒残留物或胃内容物样品处理时,可适当加大取样量。
  7.2样品测定:取待检液1ml左右于试管中,加氢氧化钠溶液10滴,加盐酸羟胺溶液5滴,置沸水中水浴5分钟(使其充分水解成氟乙酸钠释放出氨)。取出放冷,加盐酸溶液9~10滴(调pH值3~5)后,加三氯化铁溶液3~10滴(使其与氟乙酸反应),阳性结果为粉红或紫红色,尤其在滴加后的液面上更为明显(检出限可达50μg/ml)。测定时做空白对照试验,阴性结果为浅黄或黄色,有些空白对照为黄棕色絮状沉淀,静置后上层液变成无色或仅呈浅黄色。
  7.3注意事项:①加盐酸溶液9滴后要用pH试纸测试溶液pH值,若pH值太高(碱度过高),加入三氯化铁溶液时可产生红棕色沉淀,影响结果判定,造成假阳性结果;若pH值太低(酸度过高),加入三氯化铁溶液后氟乙酰胺显色不敏锐或不显色,易造成假阴性结果。pH值可用氢氧化钠溶液和盐酸溶液反向调整。②空白对照试验,是取与检样相同(不含氟乙酰胺)的物质与检样同时操作,以便于观察对比。对于呕吐物、胃内容物等样品,应加阳性对照试验。③本方法不适于血液和组织器官样品的测定。④氟乙酰胺的检测目前无国家标准分析方法,对重要案件的处理要慎重,应采用气相或液相色谱做进一步对照确定。对于中毒案件,还可根据中毒者的中毒症状作参考。⑤三氯化铁溶液放置时间长时会有少量沉淀产生,摇匀后使用。组合试剂的有效期为1年,阳性对照试验无反应时不可再用。
  方法二
  奈氏试剂法。本方法也是测定氟乙酰胺方法中较好的方法,但由于所用的奈氏试剂中需要碘化汞(毒品),需当地公安部门批准才能在试剂商店购买,这里仅提供检验方法。
  7.4奈氏试剂的配制:将10g碘化汞和7g碘化钾溶于10ml水中,另将24.4g氢氧化钾溶于内有70ml水的100ml容量瓶中,并冷却至室温。将上述碘化汞和碘化钾溶液慢慢注入容量瓶中,边加边摇动。加水至刻度,摇匀,放置2天后使用。试剂应保存在棕色玻璃瓶中,置暗处。
  7.5检测方法:将水溶性样品溶液1ml于小试管中,加入1ml奈氏试剂,如含有氟乙酰胺,会出现黄红―澄棕色沉淀,同时做空白对照试验,20分钟即可报告结果。检出限为50μg/ml。注意:氨对本方法有干扰。试剂必须闭光保存。
  8.磷化锌测定:磷化锌的检测相对复杂些,要先经硝酸银法预试为阳性后,再进行磷和锌的检验,均呈阳性时,可判断磷化锌的存在。一般情况下,可疑物呈深灰色或近似黑色又经酸溶解释放出蒜臭味时,即可考虑可能含有磷化锌的存在。可送实验室做进一步的验证。

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