异位性皮炎

异位性皮炎2009年01月01日WWW.511511.COM来源：中华现代皮肤科学杂志关键词：异位性皮炎　【摘要】目的探讨脾虚湿盛型异位性皮炎（ad）和支气管哮喘（as）患者外周血细胞因子ifn-γ和il-4的mrna表达的临床意义。方法对102例（ad61例，as41例）患者的外周血5ml应用反转录系统试剂盒及核酸测定仪进行吸光度测定。结果两组患者ifn-γmrna阳性表达显著低于对照组（p<0.01），但il-4mrna与正常对照组比较差异无显著性（p>0.05）。ad和asifn-γmrna阳性表达率，il-4mrna阳性表达率比较两组之间差异无显著性（p>0.05）。结论异病同证指几种不同疾病，在疾病过程中出现了大致相同的病理，大致相同的证，脾虚湿盛型的ad与as均显示免疫失衡状态。【关键词】异位性皮炎支气管哮喘干扰素γ白细胞介素4mrnaexpressionofifn-γandil-4inpatientswithatopicdermatitisandasthmazhangyuhuan，chenbaojiang，jiaozhenshantianjinchangzhenghospital，tianjin300021【abstract】objectivetoinvestigatethesignificanceofthemrnaexpressionofifn-γandil-4intheatopicdermatitis（ad）andasthma（as）patientswhowerediagnoseddeffciencyofspleenwithoverabundanceofdampaccordingtothetraditionalchinesemedicinetheory.methodstheperipheralbloodwascollectedin102cases（ad61cases，as41cases），analyzedthemrnaexpressionofthesecytokineusingrt-pcrsystemkit.resultscomparedwiththecontrolgroup，themrnaexpressionofifn-γinadandaspatientswerebothsignificantlydecreased（p<0.01），andil-4hadnostatisticalsignificance（p>0.05）.however，theexpressionofil-4andifn-γhadnosignificantdifferencebetweenadandas（p>0.05）.conclusiontherearebothimmuneimbalanceinadandas，theabnormalmrnaexpressionofil-4andifn-γarepartofimmuneprofileinadandaspatientswhowerediagnoseddeficiencyofspleenwithoverabundanceofdamp.【keywords】atopicdermatitisasthmaifn-γil-4异位性皮炎（atopicdermatitis，ad）和支气管哮喘（asthma，as）均属于型变态反应性疾病，脾虚湿盛是两种疾病临床常见的中医证型，临床表现的“证候”大多相同，中医病机一致。本文对102例（ad61例，as41例）患者的外周血细胞因子ifn-γ和il-4的mrna表达进行检测，探讨中医脾虚湿盛型ad与asmrna在细胞因子表达的临床意义。1资料与方法1.1临床资料102例患者来自2002年1月～2004年2月天津市长征医院变态反应科门诊，ad患者61例，其中男35例，女26例，年龄4～24岁，平均（13.6±9.8）岁，病程（1.5～11.5）年，平均（5.4±3.7）年；as患者41例，其中男24例，女17例，年龄12～38岁，平均（16.4±8.3）岁，病程1～10.5年，平均（6.5±3.6）年。对照组20例，为志愿献血者，其中男12例，女8例，年龄18～23岁，平均（20.7±4.3）岁。1.2诊断标准ad诊断标准参照1994年美国williams等提出的ad诊断标准［1］。as诊断标准参照中华医学会呼吸病学分会1997年《支气管哮喘防治指南》［2］。脾虚湿盛证参照中医诊断学标准［3］。1.3主要仪器与试剂1.3.1主要仪器pcr仪（ptc-200型mjresearch公司，美国）；超净工作台（苏净公司，苏州）；台式高速离心机（eppendorf公司，德国）；核酸自动测定仪（eppendorf公司，德国）；电泳仪（北京六一仪器厂）；凝胶自动成像系统（uvp，美国）。1.3.2主要试剂反转录系统试剂盒（美国promega公司）；depc液（sigma公司）；氯仿，异丙醇（天津化学试剂厂）；引物序列来源于文献［3］。1.4实验方法单个核细胞总rna提取：取患者和正常对照组空腹静脉血5ml，肝素抗凝，在5ml淋巴细胞分离液面上加入等量处理后的血液样本，离心，分离单个核细胞。采用核酸测定仪在260nm和280nm波长下对样品进行吸光度测定，以确定rna提取的质量，od260／280在1.8～2.0视为提取的rna纯度较高。2结果2.1外周血单个核细胞总rna提取结果琼脂糖凝胶电泳后可以清楚地看到所提取的总rna的28s和18s两条清晰的rrna条带，这说明提取的总rna完整，无明显降解，见图1。图1提取rna电泳图2.2rt-pcr结果用图像分析仪对胶片上每一泳带进行光密度扫描，结果用各细胞因子检出阳性率表示。见图2，图3。图2il-4mrnart-pcr产物电泳图电泳从左到右依次为dna-marker、β-actin和il-4图3ifn-γmrna表达电泳图电泳从左到右依次是dna-marker、β-actin和ifn-γ2.33组人群ifn-γ和il-4mrnart-pcr产物检出情况见表1。　表13组人群ifn-γ和il-4mrnart-pcr产物检出情况例（％）注：3组人群ifn-γ和il-4mrna阳性表达率间比较，*p<0.01两组患者ifn-γmrna阳性表达率均显著低于对照组（p<0.01），3组il-4mrna阳性表达率间比较差异无显著性（p>0.05）。ad组与as组ifn-γmrna阳性表达率之间比较差异无显著性（p>0.05）；并且ad组与as组il-4mrna阳性表达率比较差异无显著性（p>0.05），结果提示ad、as患者il-4mrna表达水平低于正常人。2.4统计学方法数据经spss10.0统计软件处理，各组间进行率的χ2检验。3讨论异病同证是指几种不同的疾病，在疾病过程出现了大致相同的病机，大致相同的证，疾病在其自身发展过程中出现了病因同源，病机吻合，它以一组相关的症状和体征，不同程度地揭示病因、病机、病位、病性、病势。ad与as同属型变态反应性疾病，免疫功能的失衡是ad和as发生的主要原因，均属th2优势疾病，两病均存在着t细胞亚群，体液免疫血清总ige值升高，cd4+t细胞分泌的il-4和ifn-γ的表现异常。本文对脾虚湿盛证的102例ad和as患者进行了ifn-γ和il-4mrna表达的检测，检测结果显示：61例ad患者外周血单一核细胞ifn-γ17例（27.9%），il-437例（60.6%）；41例as患者外周血单一核细胞ifn-γ11例（26.8%），il-424例（58.5%）；而20例对照组ifn-γ18例（90.0%），il-410例（50.0%），ad和as的ifn-γ均低于正常对照组（p＜0.05），差异有显著性；而il-4ad与as组均高于正常对照组，但差异无显著性（p均>0.05）。本文ad和as两组患者外周血ifn-γcd4+细胞比率均低于正常组，而外周血il-4cd4+细胞比率明显高于正常组。ifn-γ是一种由th1产生的重要的cd4+／cd8+平衡调节因子，可抑制il-4和il-4介导的ige生成。th1细胞和th2细胞在体内通过分泌不同的细胞因子促进自身的发展，抑制对方的发展。th1细胞分泌ifn-γ可抑制th2的增殖［4］，促进自身的增殖，th2细胞分泌il-4，称为th2型细胞因子，介导体液免疫，如激活β细胞和嗜酸粒细胞［5］。这些细胞因子积极参与各种生理及病理过程，在正常情况下th1／th2网络维护着动态平衡。目前判断th1／th2细胞水平主要是通过分别测定ifn-γ和il-4来间接反映其体内水平和功能。本文对102例ad与as分别测定后发现，ifn-γ低于正常对照组，经比较差异有显著性（p<0.05），而il-4高于正常对照组，经比较差异无显著性（p>0.05）。本文研究进一步证明了脾虚湿盛型的ad和as细胞因子表达的一致性，从分子生物学基础进一步证实两病异病同证的理论依据。
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