医学论文,108例小儿葡萄球菌感染的细菌学分类及抗生素耐药性分析

108例小儿葡萄球菌感染的细菌学分类及抗生素耐药性分析文章来源：　　　　2006-7-2211:45:19

108例小儿葡萄球菌感染的细菌学分类及抗生素耐药性分析

中华儿科杂志2000年第2期第38卷论著摘要

作者：单才华　贺超奇

单位：单才华（311200　浙江省萧山市第一人民医院儿科）；贺超奇（311200　浙江省萧山市第一人民医院儿科）

　　败血症是儿科院内感染的重要疾病，葡萄球菌则是导致小儿败血症的重要致病菌，随着第三代头孢类广谱抗生素的广泛应用，耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）所占比例越来越大。最近几年来对葡萄球菌的分类研究又有新的进展。为了了解小儿感染病原体中葡萄球菌的分类学及抗生素耐药性特点，我们对本院108例儿科葡萄球菌感染进行调查，报告如下。

　　材料方法

　　1.菌株来源：1996年3月～1997年间我院儿科血培养中分离出的108株葡萄球菌。其诊断标准符合小儿败血症的诊断标准［1］。

　　2.材料：血液双相培养瓶、葡萄球菌鉴定系统来自法国梅里埃公司，抗生素除万古霉素为Sigma化学公司产品；氧氟沙星为昆山制药厂厂家标准品；诺氟沙星为新昌制药厂厂家标准品；青霉素为江西东风制药厂生产，其余均为中国药品生物制品检定所生产的标准品；暂行标准品或对照品。质控菌株ATCC29213。

　　3.方法：葡萄球菌的分离及鉴定参照文献［2］及梅里埃公司配套说明，凝固酶用试管法。耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）用苯唑西林纸片、含4%NaCl的M-H琼脂35℃24h确定,凝固酶阴性葡萄球菌（CNS）延迟至48h判读。β-内酰胺酶测定为碘试管法，参照文献［3］的方法进行测定。最小抑菌浓度（MIC）采用微量肉汤稀释法［4］，根椐测定结果分别计算各种抗生素对MRS和甲氧西林敏感葡萄球菌（MSS）的最小抑菌浓度的50%（MIC50）和最小抑菌浓度的90%（MIC90），并根据临界浓度计算敏感率。

　　1.1996年3月～1997年12月间，同期不同年龄组血培养阳性率及葡萄球菌的比例提示年龄越小，则葡萄球菌性败血症的比例越高，其中1岁以下病例中血培养阳性率的比例高达10.4%，2～6岁组为7.3%,7～15岁组为5.5%。葡萄球菌性败血症的比例1岁以下病例中为70.3%,2～6岁组为38.6%,7～15岁组为27.9%。经统计学处理（χ2分析）三者差异有非常显著的意义（P＜0.01）。

　　2.108株葡萄球菌分布于10种葡萄球菌内，以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌及木糖葡萄球菌为主，上述4种葡萄球菌的分离率占94.4%（102/108）,在102株临床分离菌中，耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）占62.7%（64/102），4种葡萄球菌以金黄色葡萄球菌的MRS的分离率最高（69.1%）,其它3种葡萄球菌的MRS分离率分别为57.9%;58.3%;60.0%,经统计学处理（χ2分析）差异无显著性。不同菌种的产β-内酰胺酶率差异均无显著性，但MRS的产酶率（0.91）高于MSS的（0.74）,差异有显著性（P＜0.05）。具体结果见表1。

表1　108株临床分离菌的细菌学分布及耐药性

细菌种类菌株数　　（产β-内酰胺酶株）MRS检出率（%）　　（菌株数）金黄色葡萄球菌*42（36）69.1（29）表皮葡萄球菌38（32）57.9（22）溶血葡萄球菌**12（10）58.3（7）木糖葡萄球菌10（8）60.0（6）其它葡萄球菌△6（4）16.7（2）合计108（90）61.1（66）

　　*凝固酶100%阳性,**凝固酶8%（1/12）阳性,△共有华纳、松鼠、人型、腐生、头型、迟缓葡萄球菌各1株表2　葡萄球菌对不同药物的敏感率（%）抗生素临界浓度

　　（μg/ml）MRS（n=66）MSS（n=42）MRS敏感率（%）MIC50MIC90MRS敏感率（%）MIC50MIC90青霉素G0.1032＞12833.6864氨苄青霉素0.25064＞12829.2864苯唑青霉素2032＞128100.02.08头孢唑啉81364＞12892.00.52头孢噻肟84616＞12892.024头孢哌酮16538＞128100.048洁霉素0.50＞128＞12837.54＞128红霉素0.512＞128＞12842.62＞128氯霉素84632＞12886.3864妥布霉素43932＞12867.0232庆大霉素4386412877.01128丁胺卡那16621612882.0464四环素4371612871.02128诺氟沙星4602＞12888.0116氧氟沙星27611676.00.252环丙氟哌酸1710.51692.0＜0.121万古霉素410022100.012

　　3.对抗生素敏感性：MRS和MSS对17种抗生素敏感性试验结果，见表2。所有葡萄球菌对万古霉素均敏感，MRS对环丙沙星、丁胺卡那敏感率较高。MRS的多重耐药性较MSS严重。对17种抗生素的多重耐药在6～16种不等。

　　1.由结果可见小儿血培养阳性率高于同期成人，新生儿尤其明显。其中感染菌以葡萄球菌增加为主要因素。以前曾认为凝固酶阴性葡萄球菌为污染菌，支持这一观点的依据是凝固酶阴性葡萄球菌致病性弱，但最近的研究表明凝固酶阴性葡萄球菌具有细胞粘质等致病因子，有一定致病能力，是医院感染的重要菌种［5］。而儿童尤其是新生儿免疫功能不全是葡萄球菌感染的重要易感因素。国外的研究表明，体重过小及胎龄不足是败血症的两个高危因素，以G+球菌感染机会更大。故凝固酶阴性的葡萄球菌检出特别在新生儿血培养中检出不容忽视。

　　2.以凝固酶来鉴别葡萄球菌自60年代临床沿用多年，而后葡萄球菌属新检出的菌种日渐增多，至1991年已有30多种，且大多为凝固酶阴性，表1的结果表明了这点。故简单用凝固酶区分葡萄球菌不够科学。108株葡萄球菌共分布于10种葡萄球菌内，以金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌和木糖葡萄球菌4种为主，这和国内外报道不尽相符，可能为地域性差别所致。

　　3.以对苯唑西林的敏感性可把葡萄球菌分为耐甲氧西林葡萄球菌（MRS）和甲氧西林敏感葡萄球菌（MSS），MRS中以耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）研究较多，近来耐甲氧西林的凝固酶阴性葡萄球菌（MRScon）已引起人们的注意，有资料表明两者的耐药谱及机理都有许多相似的地方，MRS对苯唑西林耐药，是由于其细胞壁上的青霉素结合蛋白结构变异所致，而其胞内往往有多种耐药机制如对氨基糖苷类药的纯化酶、对喹喏酮类药物的耐药机理是由于DNA旋转酶的变异等，使其对多种药物耐药。MSS对青霉素类耐药仅因产生青霉素酶，一般用含有酶抑制剂的或耐酶药物敏感。我们的结果也证实这一点。MRS的比例和近年国内资料相近。对MRS较敏感的药物分别为万古霉素、环丙沙星、丁胺卡那。

　　参考文献

　　［1］张澍.现代儿科学.北京：人民军医出版社，1998.403.

　　［2］KloosWE,SchleiferKH.SimplifiedschemeforroutineidentificationofhumanStaplococcusspecies.JClinMicrobiol,1975,1:82.

　　［3］LennetteEH,ed.Manualofclinicalmicrobiology.4thed.WashingtonDC:AmericanSocietyforMicrobiology,1985.1005-1006.

　　［4］NationalCommitteeforClinicalLaboratorystandards.ApprovedstandardM7-A3.Methodsfordilutionantimicrobialsusceptibilitytsetsfotbacteriathatgrowaerobically-thiraedition.VillanovaPa:NCCLS,1993.12-18.

　　［5］罗海波.现代医学细菌学.北京:人民卫生出版社,1995.5-8.

收稿日期：1999-07-19