【摘要】 为探讨染色体异常克隆在嗜酸性粒细胞增多症诊断和鉴别诊断中的意义及克隆性嗜酸性粒细胞增多症涉及的染色体异常，收集了65例嗜酸性粒细胞增多患者的骨髓标本，培养24小时，采用G显带进行核型分析。结果表明：65例中9例拟诊为急性髓细胞性白血病M4Eo检出特异性的染色体异常inv（16），而其余的56例以嗜酸性粒细胞增多待诊的患者中5例检出染色体异常克隆，检出率为8.9%。根据临床、血液学资料并结合染色体检出结果，5例患者最后分别被诊断为急性髓系白血病伴嗜酸性粒细胞增多、慢性嗜酸性粒细胞白血病、8p11骨髓增殖综合征、慢性髓系白血病急变、急性髓系白血病M4Eo。检出的染色体异常克隆分别为+14、t（5;12）（q31;p13）、t（8;9）（p11;q32）、t（9;22）（q34;q11）和inv（16）（p13q22）。结论：在嗜酸性粒细胞增多症的诊断中，染色体的检测是判定克隆性和诊断慢性嗜酸性粒细胞白血病的重要手段，应作为常规的检测。
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【关键词】克隆性嗜酸性粒细胞增多症慢性嗜酸性粒细胞白血病染色体异常细胞遗传学
CytogeneticStudyonEosinophilia
ZHANGYan,HEQi,HUANGXiaoJun,JIANGHao，YANGShenMiao，LUJing,QINGYaZhen,SHIYan,DANGHui,QIUJingYing,LUDaoPei
PekingUniversityPeopleHospital,PekingUniversityInstituteofHematology,Beijing100044,China
AbstractTheaimofstudywastoinvestigatetheimportanceofchromosomeaberrationindifferentialdiagnosisofeosinophiliaandthechromosomalaberrationsinvolvedinpatientswithclonaleosinophilia.65casesofeosinophiliawerecollectedandchromosomespecimensofbonemarrowcellswerepreparedby24hourculture,andGbandingtechniquewasusedforkaryotyping.Theresultsshowedthatoutof65cases,chromosome16inversionwasdetectedin9patientssuspectedasM4Eo,andamongtheother56cases,5weredetectedwithchromosomalaberrations（8.9%）.Combiningclinical,hematologicalandcytogeneticaldata,the5patientswerediagnosedasacutemyeloidleukemiawitheosinophilia,chroniceosinophilicleukemia,8p11myeloproliferativesyndrome,chronicmyeloidleukemiainacutephaseandacutemyeloidleukemiaM4Eorespectively.Thedetectedchromosomalaberrationswere+14,t（5;12）（q31;p13）,t（8;9）（p11;q32）,t（9;22）（q34;q11）andinv（16）（p13q22）.Inconclusion,cytogeneticaldetectionisveryimportantindifferentialdiagnosisofclonaleosinophilicdisordersandchroniceosinophilicleukemia,whichissuggestedtobedoneroutinelyinclinic.
Keywordsclonaleosinophilicdisorder;chroniceosinophilicleukemia；chromosomalaberration;cytogenetics
JExpHematol2007;15（3）:454-457
嗜酸性粒细胞增多症是一类异质性疾病，其病因多种多样，最常见的是蠕虫感染。在特定的情况下，由于嗜酸性粒细胞的激活，其胞内颗粒的释放还可造成多器官受损。临床上，嗜酸性粒细胞增多症可分为以下3种疾病：反应性、克隆性和特发性高嗜酸性粒细胞综合征（hypereosinophilicsyndrome,HES）。一般讲，反应性嗜酸性粒细胞增多为良性过程，而克隆性嗜酸性粒细胞增多常伴发于克隆性恶性血液病，对年轻患者需要行造血干细胞移植才能够治愈。对于既往诊断HES的病例如有任何髓系细胞克隆性的依据，应诊断为慢性嗜酸性粒细胞白血病。因此，区分反应性还是克隆性嗜酸性粒细胞增多非常重要。骨髓的染色体检查通过异常克隆的检出，可判定为克隆性;并且，特异性的染色体异常如t（9;22）、t（8;21）、inv（16）还可辅助诊断恶性血液病的类型。我们将近年来在我院进行过染色体检查的嗜酸性粒细胞增多患者的临床、血液学和细胞遗传学结果作一总结，探讨染色体异常克隆在其诊断和鉴别诊断中的意义以及克隆性嗜酸性粒细胞增多症涉及的恶性血液病和染色体异常的类型。
材料和方法
病例
65例为2000年1月至2006年6月在我院行染色体检查的嗜酸性粒细胞增多患者，包括拟诊为急性髓细胞性白血病M4Eo9例。男性41例，女性24例，中位年龄36（14-87）岁。嗜酸性粒细胞增多症的诊断标准为外周血液中嗜酸性粒细胞绝对值大于＞0.45×109/L，分类超过4%，具体参照邓家栋等主编的《临床血液学》［1］。其它白血病、骨髓增殖性疾病，包括慢性嗜酸性粒细胞白血病按照2001年WHO诊断标准［2］。
标本来源均为骨髓，接种于含有20%小牛血清的RPMI1640培养液中，细胞密度为2×106/ml，置于37℃、5%CO2孵箱中培养24小时，按参考文献［3］报道的制片和G显带技术进行染色体分析。核型分析和异常克隆描述按《人类细胞遗传学国际命名体制［ISCN（2005）］》。
融合基因的检测
采用RQPCR法，根据设计原则设计相应的引物和探针，由本所分子生物学实验室完成，方法参见文献［4］。
结果
染色体异常检出率
总检出率为21.5%（14/65）,其中9例拟诊为急性髓细胞性白血病M4Eo患者均检出特异性的染色体异常inv（16）（p13q22）而明确诊断，而其余的56例以嗜酸性粒细胞增多待诊的患者中，5例（8.9%）检出克隆性染色体异常。5例中的2例检出特异性的染色体异常：t（9;22）（q34;q11）和inv（16）（p13q22）；余下的3例为非特异性异常：+14、t（5;12）（q31;p13）、t（8;9）（p11;q32）。
5例克隆性嗜酸粒细胞增多症患者的特征
病例1、3外周血中嗜酸性粒细胞绝对值均＞1.0×109/L，以嗜酸性粒细胞增多待诊，病例1骨髓染色体检出+14，而外周血淋巴细胞染色体检查正常，排除了体质性异常，因而+14为获得性克隆性异常。该病例为克隆性嗜酸性粒细胞增多，结合骨髓形态中原始粒细胞＞25%，诊断为急性髓系白血病伴嗜酸性粒细胞增多；病例3骨髓染色体检出累及8p11的8号和9号染色体相互易位，明确诊断为8p11骨髓增殖综合征，而且染色体除8p11受累外还有+21的附加异常，提示疾病可能已向急性髓系白血病发展，患者的骨髓形态学检查原始细胞已增高。病例2外周血和骨髓中嗜酸性粒细胞重度增高，以嗜酸性粒细胞白血病待诊，骨髓染色体检出t（5;12）,明确了诊断，并排除了慢性髓系白血病伴嗜酸性粒细胞增高。病例4初始诊断为急性嗜酸性粒细胞白血病，但染色体检出特异性的t（9;22）易位，结合患者的骨髓形态学分析，修正诊断为慢性髓系白血病急变期。病例5初始诊断为嗜酸性粒细胞白血病，但染色体检出特异性的inv（16）,因此修正诊断为急性髓系白血病M4Eo。5例患者的临床、血液学和细胞遗传学特征见附表。
讨论
临床上多种疾病可导致外周血中嗜酸性粒细胞增多，如寄生虫感染、变态反应疾病、皮肤疾病、结缔组织病、胃肠道疾病、肿瘤性疾病等。因此，嗜酸性粒细胞增多症可分为3类：第1类为反应性嗜酸性粒细胞增多症，如上述的寄生虫感染，尤其是蠕虫感染，变态反应疾病等；第2类为克隆性嗜酸性粒细胞增多症，包括慢性嗜酸性粒细胞白血病（CEL）；第3类为高嗜酸性粒细胞综合征（HES）［5］。临床诊断中首要的是区分反应性还是克隆性嗜酸性粒细胞增多，判定克隆性疾病所致嗜酸性粒细胞增多有如下的方法［6］：异常染色体、女性杂合子G6PD同功酶、嗜酸性粒细胞克隆培养异常染色体、KRAS基因突变等，上述方法中染色体异常克隆的检出是最直接的证据。
文献报道，在中到重度的嗜酸性粒细胞增多症中，克隆性嗜酸性粒细胞增多仅占0.9%［7］。我们除M4Eo外的56例嗜酸性粒细胞增多患者中染色体异常克隆检出率为8.9%，检出率显著高于文献报道，分析原因：①这是国外1997年发表的一篇文摘，且文中的克隆性嗜酸性粒细胞增多仅涉及MDS伴嗜酸增高，未包括其
