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云南放牧人群汉赛巴尔通体感染的血清学调查

2009-12-08 journal.shouxi.net A +

云南放牧人群汉赛巴尔通体感染的血清学调查首席医学网2009年03月24日17:24:05Tuesday中华临床医师杂志征稿内科临床新进展研讨班重症与血流动力学大会血液净化技术学习班医学类核心期刊征稿第六届世界中医药大会2009世界高血压大会第四届中国国际白血病急危重病护理交流会IOF亚洲骨质疏松班2009年中国药学大会医学影像学术交流会结直肠肛门外科会议口腔正畸学术会议征稿广东研究生学术论坛

作者:杨发莲白鹤鸣杨慧于彬彬作者单位:云南省地方病防治所,云南大理671000

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【摘要】目的了解汉赛巴尔通体(Bartonellahenselae)在云南放牧人群中的感染情况。方法采用间接免疫荧光抗体测定法(IFA)检测放牧人群血清的汉赛巴尔通体IgG抗体。结果91份放牧人群血清汉赛巴尔通体IgG抗体,检出阳性13份,阳性率为14.28%,其中5份滴度为1:320、3份为1:1000、5份达1:3200。结论放牧人群中存在感染汉赛巴尔通体的机率较高。放牧人群同时可被布鲁氏菌和汉赛巴尔通体感染。

【关键词】云南放牧人群汉赛巴尔通体血清学

巴尔通体病(Bartonelosis)是20世纪90年代发现的一类新的人畜共患病。巴尔通体(Bartonella)是病原体,巴尔通体属的成员已由原来的1个种发展到21种及3个亚种,其中有9个种与人类感染密切相关[1,2]。其中汉赛巴尔通体是猫抓病(CatScratchdisease,CSD)的病原体,目前该种可分为2个亚型即:Houston型和Marseille型[3]。猫抓病通常为被感染了该病原体的猫抓伤或咬伤后发展成的伴有局部淋巴结炎的自限性感染。它不仅可致人类猫抓病,慢性淋巴结炎,心内膜炎、视神经炎等疾病,还可引起免疫缺陷病人的杆菌性血管瘤-杆菌性紫癜(BAP)。是目前已知的致病种类最多的巴尔通体[4]。  云南农村养猫较为普遍,且一户多种牲畜混养较多见,人们和猫及其他牲畜密切接触。在已往的巴尔通体调查中发现云南省鼠类尤其是家鼠中巴尔通体感染率较高[5~7]。因此人在这样环境中存在感染巴尔通体的可能性。之前已分别在健康人群和不明原因发热病人中进行调查[8,9],发现均存在巴尔通体感染。为了解汉赛巴尔通体在云南放牧人群中的感染情况,我们对云南省昆明市石林县的部分放牧人员进行了汉赛巴尔通体的抗体调查,结果报告如下。

  1材料和方法

  1.1血清91份放牧人员血清采自昆明市石林县,年龄21~70岁,多为男性,少数女性,均有与羊群密切接触史。所收集的血清低温保存、备检。

  1.2IIFT试剂及用品购于德国欧蒙医学实验诊断股份公司。

  1.3实验步骤用PBS-Tween20稀释血清,即10.1μl血清加入1000μlPBS-Tween20中,混匀。按顺序分别滴25μl稀释后的血清加至加样板的反应区中,将载片覆有生物薄片的一面朝下,盖在加样板表面的凹槽里,室温温育30min(使抗原抗体充分反应)。后以PBS缓冲液流水冲洗载片1s,然后立即将其浸入PBS缓冲液中浸洗5min。从PBS缓冲液中取出载片,用吸水纸擦干背面及边缘后,将载片覆有生物薄片的一面朝下,盖在加有20μlFITC标记的抗人免疫球蛋白的加样板的凹槽里,再次室温温育30min后同样冲洗1s,浸入加有10滴伊文氏蓝的PBS缓冲液中浸洗5min。取出载片用吸水纸擦干背面及四周后,将载片覆有生物薄片的一面朝下,加甘油封片,200倍荧光显微镜下读片。根据公司提供技术资料,以滴度≥1:320++定为阳性(感染),≥1:1000++和≥1:320++++为急性感染。

  2结果  91份放牧人员血清检出阳性13份,阳性率为14.28%(其中5份滴度为1:320、3份为1:1000、5份达1:3200)。其中包括布鲁氏菌病(Brucellosis)抗体阳性的(试管凝集法)41份,检出抗汉赛巴尔通体IgG抗体阳性7份,阳性率为17.07%,其余50份为布鲁氏菌病抗体阴性,检出抗汉赛巴尔通体IgG抗体阳性6份,阳性率为12.0%;两种人群均无统计学意义(χ2=0.1483,P>0.05)。

  3讨论  随着宠物养殖业的不断发展,由巴尔通体引起的疫病呈上升趋势,对人畜健康带来巨大的威胁。此前栗冬梅等用分子生物学技术确诊北京一患者为猫抓病,从序列分析看,这例北京患者感染的巴尔通体与云南省鼠类宿主中分离的巴尔通体是同一种[10]。证明云南存在能引起猫抓病的巴尔通体。2002年白瑛等从云南省健康人群中查到抗伊丽莎白巴尔通体(B.elizabethae)抗体[8];2004~2006年我们先后在不明原因发热病人中查到抗汉赛巴尔通体和抗五日热巴尔通体(B.quintana)抗体[9]。说明这些巴尔通体感染在云南人群中有分布。以往对16个县(市)的鼠类感染调查中,先后从5属11种鼠中证实巴尔通体在不同地区、不同气候环境中均有分布,呈现出对不同地理和气候环境具有广泛适应性[11];同时从猫栉首蚤、缓慢细蚤、客印鼠蚤、泸水栉眼蚤及微小牛蜱等寄生自狗、黄牛、黄胸鼠及猫的几种媒介中检出巴尔通体[12,13]。综上所述,说明云南存在广泛的巴尔通体宿主、传播媒介和由巴尔通体感染的疾病。  巴尔通体属于变形菌纲(Proteobacteria)、α2亚群(Alphaproteobacteria)、根瘤菌目(Rhizobiales),与布鲁氏菌(Brucelloes)有较高同源性[14]。放牧人群是布鲁氏菌病的职业人群,该人群多居住在农村和猫及其他牲畜密切接触。发热均为巴尔通体感染人体和布鲁氏菌病最常见的症状。在放牧人群中进行汉赛巴尔通体感染调查可对深入研究两种疾病的病原学、流行病学、诊断、鉴别诊断及防治等具有重要的意义。  本次调查检出阳性13份,阳性率为14.28%。放牧人群长期生产生活在野外,与鼠类及牲畜密切接触,因此潜在感染巴尔通体的机率较高。91份中布鲁氏菌抗体阳性(试管凝集法)和抗体阴性两种人群阳性率分别为17.07%、12.0%,均无统计学意义,说明放牧人群均普遍易感。7份同时为抗布鲁氏菌抗体及抗汉赛巴尔通体IgG抗体阳性,说明放牧人群同时可被布鲁氏菌和汉赛巴尔通体感染,它们之间诊断、治疗及预防等方面有无影响需进一步探索。

【参考文献】  [1]MaguinaC,CotuzzoE.Bartonellosis;Newandold[J].InfectDisClinNorthAm,2000,14:1~22.  [2]白鹤鸣.巴尔通体菌[J].微生物学杂志,2005,25(6):70~72.  [3]IredellJ,BlanckenbergD,ArvandM,etal.CharacterizationofthenaturalpopulationofBartonellahenselaebymultilocussequencetyping[J].JClinMicrobiol,2003,41:5071~5079.  [4]栗冬梅,俞东征,刘起勇.对巴尔通体感染的新认识[J].中国媒介生物学及控制杂志,2003,14:479~483.  [5]白瑛,KosoyMY,MaupinGO,等.首次证实巴尔通体在我国云南鼠群中流行[J].中国人兽共患病杂志,2002,18:5~9.  [6]白鹤鸣,杨发莲,杨慧,等.云南省西部地区鼠群中巴尔通体感染的调查[J].中华流行病学杂志,2005,26(11):868~870.  [7]白瑛,王国良.从云南省滇西南地区鼠群中分离到巴尔通体[J].中华流行病学杂志,2003,24(增刊):96~98.  [8]白瑛,KosoyMY,白鹤鸣,等.云南健康人群巴尔通体感染的血清学评估[J].中国地方病防治杂志,2004,19:17~19.  [9]杨慧,白鹤鸣,杨发莲,等.云南巴尔通体感染的血清学调查[J].中国自然医学杂志,2007,9(4):277~280.  [10]栗冬梅,俞东征,刘起勇,等.用分子生物学技术诊断巴尔通体感染[J].中华流行病学杂志,2004,25(7):602~606.  [11]栗冬梅,俞东征,刘起勇,等.云南省不同环境鼠形动物巴尔通体感染情况的研究[J].中华流行病学杂志,2004,25(11):934~937.  [12]栗冬梅,刘起勇,俞东征,等.用PCR方法检出蚤类携带巴尔通体[J].中国媒介生物学及控制杂志,2005,16(10):5~8.  [13]栗冬梅,刘起勇,俞东征,等.蚤、蜱中巴尔通体的分离培养及检测鉴定[J].中国人兽共患病杂志,2005,21:1052~1058.  [14]BrennerDJ,ConnorSPO,WinklerHH,etal.ProposalstounifythegeneraBartonellaandRochalimaea,withdescriptionsofBartonellaquintanacomb.Nov.,Bartonellavinsoniicomb.Nov.Bartonellahenselaecomb.Nov.,andBartonellaelizabethaecomb.Nov.,andtoremovethefamilybartonellaceaefromtheorderRickettsiales[J].IntJSystBacteriol,1993,43:777~786.

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