一、直接镜检
将可疑食物，呕吐物，粪便作涂片，革兰染色，在显微镜下，根据细菌形态，排列及染色特性检出葡萄球菌，一般要求超过其他菌数25％，每克食物含菌应达数亿，诊断即可成立。
二、细菌培养
可疑食物，呕吐物或粪便经高盐血琼脂培养基或用氯化锂盐蛋黄培养，如未检出葡萄球菌，并不能否定诊断，因细菌在食物加热时葡萄球菌被杀灭，但肠毒素耐高温，未能破坏，仍能致病。
三、毒素测定
血清学试验应用血清学直接检测食物浸出液，培养物或滤液等标本的肠毒素。
1、反向间接血凝法：用各种型肠毒素的免疫球蛋白致敏鞣酸处理过的红细胞，后加入被检的含肠毒素的标本，经一两小时血细胞凝集阳性，可作快速诊断。
2、免疫荧光法：用荧光素标记的抗毒素血清与葡萄球菌培养物或食物滤液进行混合，在荧光显微镜下，检查肠毒素。
3、放射免疫法：用125I标记的肠毒素通过放射免疫法检查肠毒素。
动物实验取可疑食物或呕吐物接种肉汤培养基，孵育后取滤液注射猫腹腔，4h发生食物中毒症状，提示可能存在肠毒素。
