【摘要】：目的建立横纹肌肉瘤耐药模型，分析多药耐药相关标志mdr1、mrp的表达，了解P-糖蛋白（P-gp）、多药耐药相关蛋白（MRP）在眼眶横纹肌肉瘤组织中的关系及临床意义，为阐明眼眶横纹肌肉瘤多药耐药（MDR）机理、改善化疗方案、判断预后及逆转耐药提供理论依据和临床实际参考。方法1．以长春新碱（VCR）为诱导剂，浓度递增法对人横纹肌肉瘤细胞系RD细胞在体外进行诱导实验，建立耐VCR的横纹肌肉瘤耐药细胞系RD／VCR。2．细胞计数法分析细胞的生长曲线，MTT法检测药物敏感性，光学显微镜和电子显微镜观察耐药前后细胞的形态学变化。RT-PCR法定量分析RD、RD／VCR细胞中mdr1和mrp基因表达水平，免疫组化法检测RD、RD／VCR细胞中P-gp、MRP的表达。3．免疫组化法检测42例眼眶横纹肌肉瘤组织和10例正常眼眶组织中P-gp、MRP的表达状况。结果1．RD／VCR细胞对长春新碱、阿霉素（ADM）、鬼臼乙叉甙（VP16）和放线菌素D（DAC）交叉耐药，对氟尿嘧啶（5-FU）、顺铂DDP）无明显耐药性。RD／VCR细胞的群体倍增时间与RD细胞无显著差异，其形态学变化体现在超微结构上。2．RD／VCR细胞有mdr和pmRNA较高表达，P－gp、MRP表达阳性；RD细胞mdrmRNA低表达，pmnvA、P唱p、MRP表达阴性。3．P名p、MRP在眼眶横纹肌肉瘤组织中的表达阳性率分别为38．10％和54．76％，显著高于正常眼眶组织中；二0＊495，＊二0＊004）：卜gp、MRP表达与年龄、性别、组织学类型、分期无关：复发组P－pp示MRP的阳性表达率显著高于奶发组（p；－0＊078，pZ＝00186）；P－gp表达与MAI，表达间未见相关性。结论1．VCR可诱导横纹肌肉瘤细胞产生多药耐药，其机制与mdr／P－gp和mrp／MRP表达有关，在形态学研究中，电镜观察不容忽视。2．眼眶横纹肌肉瘤组织的获得性耐药与Pgp、MRP过表达有关，但两蛋白在耐药中各有作用，检测Pgp．MRP的表达对判断预后有参考价值。
